人幽門螺桿菌(HP)酶聯免疫分析(ELISA)實驗原理
本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中幽門螺桿菌(HP)含量。
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人幽門螺桿菌(HP)水平。用純化的人幽門螺桿菌(HP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入幽門螺桿菌(HP),再與HRP標記的幽門螺桿菌(HP)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的幽門螺桿菌(HP)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人幽門螺桿菌(HP)濃度。
試劑盒組成:
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2 |
標準品:72ng/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2 |
濃縮洗滌液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2 |
樣本處理及要求:
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4.細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2
檢測范圍:
0.7ng/L -50ng/L
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:2
2.有效期:6個月